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大腸菌群計數(shù)設(shè)備和試劑

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大腸菌群coliforms
一群在36℃ 條件下培養(yǎng)48h 能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸產(chǎn)氣的需氧和兼性厭氧革蘭氏陰性無芽胞桿菌。該菌群主要來源于人畜糞便,作為糞便污染指標評價食品的衛(wèi)生狀況,推斷食品中腸道致病菌污染的可能。
2.2
最可能數(shù)most probable number ; MPN
基于泊松分布的一種間接計數(shù)方法。
3 設(shè)備和材料
除微生物實驗室常規(guī)滅菌及培養(yǎng)設(shè)備外,其他設(shè)備和材料如下:
3.1 恒溫培養(yǎng)箱:36℃±1℃ 。
3.2 冰箱:2℃-5℃ 。
3.3恒溫水浴箱:46℃±1℃ 。
3.4天平:感量0.1g
3.5 均質(zhì)器
3.6振蕩器
3.7 無菌吸管:1mL(具0.01ml刻度)、10ml(具0.1ml刻度)或微量移液器及吸頭。
3.8 無菌錐形瓶:容量500ml。
3.9 無菌培養(yǎng)皿:直徑90 mm 。
3.10 pH 計或pH 比色管或精密pH 試紙。
3.11 菌落計數(shù)器或PetrifilmTM自動判讀儀。

4 培養(yǎng)基和試劑
4.1 月桂基硫酸鹽胰蛋白胨(lauryl sulfat .tryptose , LST )肉湯:見第A.1 章。
4.2 煌綠乳糖膽鹽(brilliant grecn lactose bile , BGLB )肉湯:見第A.2 章。
4.3 結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂(violet red bile agar , VRBA )
4.4 磷酸鹽緩沖液
4.5 無菌生理鹽水:稱取8.5g 氯化鈉溶于1000ml蒸餾水中,121℃ 高壓滅菌15 min 。
4.6 1mol/L氫氧化鈉(NaOH ) :稱取40g 氫氧化鈉溶于1000ml蒸餾水中。
4.7 1mol/L 鹽酸(HCI ) :移取濃鹽酸90ml,用蒸餾水稀釋至1000ml。
4.8 Petrifiltm大腸菌群檢驗測試片和壓板。

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